HLA上海亲子鉴定str分型
HI,A分型方法可归纳为3类,其中微量淋巴细胞毒试验主要用于检测HLA-
A、B、C、DR和DQ基因座的抗原;淋巴细胞培养试验主要检测HLA-D和DP基
】刭座的抗原; DNA分析可检测HLA所有等位基因。
一、血清学分型
【一)上海亲子鉴定str分型微量淋巴细胞霉性试验
微量淋巴细胞毒试验(microLymphocytotoxic test)或称补体依赖的细胞毒试
验(complementd已pendent cytotoxic tesi)首先由rllera saki在1964年建立,后经美
国国立卫生研究院( Na tional InSrirute of Health,NIH)标准化,故又称NIH技术。
分型原理为淋巴细胞膜上的HLA抗原与已知HLA m清中相应抗体结合后,形成
抗原抗体复合物·再结合朴体。被激活的补体系统产生细胞毒性,攻击并破坏淋巴
细胞。经过染色·染料进入破损细胞内着色,为阳性结果。如果抗原与抗体未结合
成抗原抗体复合物·则不能结合补体,细胞膜完整,染料无法进人细胞内,为阴性结
果.在倒置相差显微镜下观察,计数着色细胞即死细胞所占细胞数目的百分比。
—般认为死细胞>20%JJ阳性反应,即表示该细胞膜上有与抗体相应的抗原。反
之,无此种抗原。分型方法的步骤为:
1.淋巴细胞分1岛用于HLA-A、B、C分型。
1)采集肝索抗凝全血305 ml(lOO单位肝索/ml血)。 |