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DNA扩增过程遵循酶促动力学原理 |
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| DNA扩增过程遵循酶促动力学原理 |
| 亲子鉴定在做实验PCR反应中，DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。在反应初期，目的DNA片段呈指数增加，随着目的DNA产物的逐渐积累，在引物-模板与DNA聚合酶达到一定比例时，酶的催化反应焰于饱和，此时目的DNA片段的增加减慢进入相对稳定状态，即出现所谓的“停滞效应”或“平台期”。亲子鉴定平台期的出现可能与下列因素有关：①引物与dNTP消耗过多；②长时间高温使Taq DNA聚合酶的活性下降；③匆“增终产物（焦磷酸盐和双链DNA）的抑制作用；④非特异性产物与引物二聚体对反应物的竞争；⑤高浓度产物使扩增产物解链不完全；⑥当产物浓度高于iO-emol/L时，可能降低Taq DNA聚合酶的延伸和加工能力，或出现引物的分支迁移物移位；⑦酶与PCR产物结合后，游离浓度降低．到达平台期所需PCR循环次数取决于模板DNA的拷贝数、PCR扩增效率、DNA聚合酶wj种类l活性、非特异性产物的竞争等因索。
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